15种杀菌剂对棉铃疫病的室内毒力测定及防治效果

摘要：烂铃是棉花生产中的重要病害，其中疫病的发病比例（90%）最高，为筛选有效的化学药剂，采用菌丝生长速率法测定了15种杀菌剂对棉铃疫病病原菌（临清）的毒力，并对抑菌活性较好的药剂进行离体棉铃药效试验。毒力测定结果表明：EC50值低于300 mg/L的有10种，分别是：多抗霉素、苯醚甲环唑、吲唑磺菌胺、肟菌酯·戊唑醇、吡唑醚菌酯、氢氧化铜、烯酰吗啉、氟啶胺、醚菌酯、嘧菌酯；药效结果表明，接菌前施用50%吲唑磺菌胺水分散粒剂800 mg/L、0.3%多抗霉素水剂100 mg/L、50%烯酰吗啉水分散粒剂1 800 mg/L、10%苯醚甲环唑水分散粒剂600 mg/L和0.3%多抗霉素水剂50 mg/L的防效分别为84.38%、81.25%、76.56%、73.44%和70.83%，防治效果较好；接菌后施用10%苯醚甲环唑水分散粒剂600 mg/L、75%肟菌酯·戊唑醇水分散粒剂800 mg/L、0.3%多抗霉素水剂100 mg/L和10%苯醚甲环唑水分散粒剂300 mg/L的防效分别为52.48%、51.49%、49.50%和47.52%，防治效果较好。

关键词：棉铃疫病；杀菌剂；毒力；药效

中图分类号：S482.2 文献标识号：A 文章编号：1001-4942（2018）11-0119-05

Abstract Boll rot is the important disease in cotton production， in which，the incidence rate of cotton boll rot was the highest （90%）. In order to screen effective fungicides， the toxicities of fifteen fungicides to the pathogen isolate of cotton boll blight （Linqing） were determined by the method of mycelium growth rate in vitro， and then the control effects of fungicides with good antibacterial activity were tested on cotton bolls. The results of toxicity test showed that the EC50 value of 10 fungicides （polyoxin， difenoconazole， amisulbrom， trifloxystrobin·tebuconazole， pyraclostrobin， cupric hydroxide， dimethomorph， fluazinam， kresoxim-methyl， azoxystrobin） were lower than 300 mg/L. The results of control effects showed that 50% amisulbrom WG （800 mg/L）， 0.3% polyoxin AS （100 mg/L）， 50% dimethomorph WG （1 800 mg/L）， 10% difenoconazole WG （600 mg/L） and 0.3% polyoxin AS （50 mg/L） showed better control effects for non-inoculated cotton bolls with the value of 84.38%， 81.25%， 76.56%， 73.44% and 70.83% respectively；and 10% difenoconazole WG （600 mg/L）， 75% trifloxystrobin·tebuconazole WG （800 mg/L）， 0.3% polyoxin AS （100 mg/L） and 10% difenoconazole WG （300 mg/L） showed better control effects for inoculated cotton bolls with the value of 52.48%， 51.49%， 49.50% and 47.52%， respectively.

Keywords Cotton boll blight； Fungicides； Toxicity； Control effect

棉花鈴病是对棉花生产中棉铃病害的统称，多种病原菌均可侵染棉铃引发铃病，据报道仅真菌就有42种[1]。我国棉花铃病主要包括疫病、红腐病、炭疽病、黑果病、红粉病、角斑病、软腐病、曲霉病、灰霉病和黑斑病10 种[2]，其中疫病的发病比例最高，占90%以上，是铃病中最主要的种类[3]。苎麻疫霉（Phytophthora boehmeriae Sawada）是导致棉铃疫病的重要病原菌[4]，其不仅直接为害棉铃导致棉铃疫病，同时还为其他弱致病力病原菌侵染棉铃打开通道[5-8]。山东一般年份棉花烂铃率在10%左右，严重可达60%以上。目前针对棉铃疫病的登记药剂只有三乙膦酸铝，且棉农对于防控铃病的药剂及用量普遍缺乏科学指导，部分棉农仍是通过采摘烂铃后晾晒收获僵瓣籽棉，因此本研究测定了15种杀菌剂对棉铃疫病的室内毒力，旨在为有效防控棉花烂铃提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 供试菌株 于2016年在山东棉花研究中心试验站（临清）田间采集棉铃疫病发病青铃，室内通过常规组织分离法分离获得致病菌，后单孢分离进行纯化，并按照柯赫氏法则回接棉铃进行验证，最后形态学鉴定为苎麻疫霉（Phytophthora boehmeriae）。菌株于4℃冰箱中保存，备用。

1.1.2 供试药剂 80%代森锰锌可湿性粉剂（山东省济南一农化工有限公司），500 g/L氟啶胺悬浮剂（连云港禾田化工有限公司），50%烯酰吗啉水分散粒剂（上海禾本药业股份有限公司），75%百菌清可湿性粉剂、90%三乙膦酸铝可溶性粉剂、10%苯醚甲环唑水分散粒剂（利民化工股份有限公司），80%多菌灵可湿性粉剂（江阴福达农化股份有限公司），250 g/L嘧菌酯悬浮剂[先正达（中国）投资有限公司]，50%异菌脲悬浮剂（江西禾益化工股份有限公司），46%氢氧化铜水分散粒剂（美国杜邦公司），0.3%多抗霉素水剂（山东省乳山韩威生物科技有限公司），30%醚菌酯悬浮剂（江苏剑牌农化股份有限公司），50%吲唑磺菌胺水分散粒剂（日本日产化学工业株式会社），75%肟菌酯·戊唑醇水分散粒剂（拜耳股份公司），250 g/L吡唑醚菌酯乳油[巴斯夫植物保护（江苏）有限公司]。

1.1.3 培养基 马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）：马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂粉20 g，去离子水1 L，121℃灭菌30 min。

1.2 试验方法

1.2.1 室内毒力测定 将棉铃疫病病原菌Lq-1于PDA平板培养5天后，自菌落边缘打取直径为5 mm的菌饼，将菌饼接种到含有等量不同药剂的PDA培养基上，以含有等量无菌水的培养基为对照，置于25℃恒温培养箱培养。共15个处理，每处理均5次重复。培养6天后采用十字交叉法测量菌落直径。计算各处理的菌落增长直径及抑制率。

1.2.2 不同药剂处理对棉铃疫病的防治效果試验 选择7种抑菌活性较好的杀菌剂，采用离体棉铃人工接种方法，测定其对棉铃疫病的侵染及发病后的抑制作用，每个处理10个棉铃，重复3次。

（1）病菌侵染前药剂处理：于棉花盛铃期从田间采集带铃柄健康成铃（ 直径约2.5 cm，品种为鲁棉1143），去掉苞叶，用75%乙醇表面消毒后晾干备用。棉铃浸药10秒后晾干，将供试苎麻疫霉菌盘（12 h光暗交替、25℃PDA培养基上培养5天，在菌落边缘用打孔器制作的直径5 mm菌盘） 贴接在棉铃中下部铃缝间，铃柄用湿润的棉球包裹后放入带有支撑泡沫的保湿培养盒内，置于培养箱中12 h光暗交替、25℃恒温培养1天，取下菌碟并继续培养5天，调查发病情况，计算各处理病情指数和防效。

（2）病菌侵染后药剂处理：于棉花盛铃期从田间采集带铃柄健康成铃（ 直径约2.5 cm，品种为鲁棉1143），去掉苞叶，用75%乙醇表面消毒后晾干备用。在棉铃中下部铃缝间表面用消毒针刺3个小孔，小孔按3 mm长等边三角形排列，打孔深度约3 mm，将供试苎麻疫霉菌盘贴接在棉铃小孔上，铃柄用湿润的棉球包裹后放入带有支撑泡沫的保湿培养盒内，置于培养箱中12 h光暗交替、25℃恒温培养1天后将菌碟取下，将整个棉铃浸药处理（对照浸纯水处理）10 s后继续培养5天，调查发病情况，计算各处理病情指数和防效。

（3）发病级别划分标准：0 级，未发病；1级，病斑面积占整个棉铃表面积的25%以下；2级，病斑面积占整个棉铃表面积的25%～50%；3级，病斑面积占整个棉铃表面积的50%～75%；4级，病斑面积占整个棉铃表面积的75%以上。

1.3 数据处理及分析方法

采用Microsoft Excel 2016和IBM SPSS statistics 20软件对试验数据进行处理分析，采用probit模型，以设定的质量浓度对数（x）为横坐标、抑制率几率值（y）为纵坐标，拟合杀菌剂毒力回归方程y = bx + a，并计算相关系数（r）和有效抑制中浓度（EC50）；采用Duncan’s新复极差（DMRT）法对各处理间防效的差异显著性进行检验。

抑制率（%）= （对照菌落直径-处理菌落直径）/对照菌落直径 × 100。

病铃率（%）=病铃数/总铃数 × 100。

病情指数（%）=Σ（各级病铃数 × 相对级数值）/（总铃数 × 4）× 100。

防治效果（%）=（对照处理病情指数-药剂处理病情指数）/对照处理病情指数 × 100。

2 结果与分析

2.1 室内毒力试验结果

如表1所示，不同杀菌剂对临清采集的棉铃疫病致病菌抑制效果差别较大，EC50值在100 mg/L以下的有5种，按由低到高排列分别是：0.3%多抗霉素水剂、10%苯醚甲环唑水分散粒剂、50%吲唑磺菌胺水分散粒剂、75%肟菌酯·戊唑醇水分散粒剂、250 g/L吡唑醚菌酯乳油；介于100 ～ 300 mg/L的有5种，按由低到高排列分别是：46%氢氧化铜水分散粒剂、50%烯酰吗啉水分散粒剂、500 g/L氟啶胺悬浮剂、30%醚菌酯悬浮剂、250 g/L嘧菌酯悬浮剂，其他5种杀菌剂EC50值均高于500 mg/L。

2.2 人工接菌前药剂处理的防效结果

选择抑菌效果好的7种杀菌剂，对离体棉铃进行防效测定，结果（表2）表明：50%吲唑磺菌胺水分散粒剂800 mg/L、0.3%多抗霉素水剂100 mg/L和50%烯酰吗啉水分散粒剂1 800 mg/L 3个处理的防效最高，达75%以上，且防效差异不显著；10%苯醚甲环唑水分散粒剂600 mg/L、0.3%多抗霉素水剂50 mg/L、50%吲唑磺菌胺水分散粒剂400 mg/L 3个处理的防效依次降低，分别为73.44%、70.83%和68.75%；10%苯醚甲环唑水分散粒剂300 mg/L、250 g/L吡唑醚菌酯乳油1 200 mg/L、50%烯酰吗啉水分散粒剂900 mg/L 3个处理防效均为67.19%，6个处理防效差异不显著；75%肟菌酯·戊唑醇水分散粒剂800 mg/L、250 g/L嘧菌酯悬浮剂1 800 mg/L、250 g/L吡唑醚菌酯乳油600 mg/L、75%肟菌酯·戊唑醇水分散粒剂400 mg/L、250 g/L嘧菌酯悬浮剂900 mg/L 5个处理的防效最低，介于50.00%～64.06%之间。

2.3 病菌侵染后药剂处理的防效结果

试验结果（表3）表明：10%苯醚甲环唑水分散粒剂600 mg/L、75%肟菌酯·戊唑醇水分散粒剂800 mg/L、0.3%多抗霉素水剂100 mg/L、10%苯醚甲环唑水分散粒剂300 mg/L、0.3%多抗霉素水剂50 mg/L、75%肟菌酯·戊唑醇水分散粒剂400 mg/L 6个处理防效依次降低，但均在40%以上，最高为52.48%；防效介于30%～40%之间的仅有50%吲唑磺菌胺水分散粒剂800 mg/L 1个处理；50%烯酰吗啉水分散粒剂1 800 mg/L、50%吲唑磺菌胺水分散粒剂400 mg/L、250 g/L嘧菌酯悬浮剂1 800 mg/L、250 g/L吡唑醚菌酯乳油1 200 mg/L、50%烯酰吗啉水分散粒剂900 mg/L、250 g/L吡唑醚菌酯乳油600 mg/L、250 g/L嘧菌酯悬浮剂900 mg/L 7个处理的防效均在30%以下且差异不显著。

3 讨论与结论

目前对于铃病的防治，可以采用减少病原、合理密植、适量氮肥、摘除烂铃及生物防治等常规方法[9-11]，鹿秀云等[12]提出棉田垄间覆膜对铃病的防效可达70%，唐薇等[13]提出的简化整枝、多去除棉株下部果枝可改善棉株中下部棉铃生长环境，减轻铃病发生。但化学药剂仍是防治棉花铃病最有效的措施之一。

本试验就15种杀菌剂对棉铃疫病菌的室内毒力进行测定，筛选出10种抑菌活性较好的药剂，其EC50值均低于300 mg/L，包括多抗霉素、苯醚甲环唑、吲唑磺菌胺、肟菌酯·戊唑醇、吡唑醚菌酯、氢氧化铜、烯酰吗啉、氟啶胺、醚菌酯、嘧菌酯。挑选其中抑菌效果较好的7种药剂，通过先施药后接菌和先接菌后施药模拟田间发病前和发病后两种施药时机，比较各处理对棉铃疫病的防效。接菌前施用50%吲唑磺菌胺水分散粒剂800 mg/L、0.3%多抗霉素水剂100 mg/L、50%烯酰吗啉水分散粒剂1800 mg/L、10%苯醚甲环唑水分散粒剂600 mg/L和0.3%多抗霉素水剂50 mg/L的防效分别为84.38%、81.25%、76.56%、73.44%和70.83%，防治效果较好；接菌后施用10%苯醚甲环唑水分散粒剂600 mg/L、75%肟菌酯·戊唑醇水分散粒剂800 mg/L、0.3%多抗霉素水剂100 mg/L和10%苯醚甲环唑水分散粒剂300 mg/L 的防效分别为52.48%、51.49%、49.50%和47.52%。比较接菌前施药和接菌后施药的防效，发病前施药效果明显好于发病后施药，防效差值最大达49.73个百分点，最小为9.76个百分点，不同药剂间防效差值变化较大，但相同药剂不同浓度的防效差值变化不大。防效差值大的药剂更适于病菌侵染前或棉铃疫病发生初期使用，包括250 g/L吡唑醚菌酯乳油、250 g/L嘧菌酯悬浮剂、50%烯酰吗啉水分散粒剂和50%吲唑磺菌胺水分散粒剂4种药剂；而0.3%多抗霉素水剂、10%苯醚甲环唑水分散粒剂和75%肟菌酯·戊唑醇水分散粒剂3种药剂的病菌侵染前施药和病菌侵染后施药防效差值小，更适合棉铃疫病发生中后期使用。防治过程中注意几种药剂交替使用，可在保证防效的基础上延缓棉铃疫病菌对药剂抗药性的产生[14]。

参 考 文 献：

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