细胞DNA定量分析与液基细胞学检查在宫颈癌普查中的效果分析
【摘 要】目的：通过液基细胞学技术（TCT）与DNA定量分析技术联合应用的方法进行宫颈癌筛查，并对两种方法的准确性进行对比，以提高宫颈癌普查的工作效率和准确率，并对细胞学检查阳性和DNA定量分析可见异常细胞的病例的进一步检查和治疗做出指导。方法：对鄂尔多斯地区2012年三八妇女节期间参加宫颈癌普查的8854名妇女取材，分别进行液基细胞学检查（TCT）和DNA定量分析检查，液基细胞学诊断应用TBS分级标准，由病理医生做出诊断，DNA定量分析由全自动DNA倍体分析系统进行自动扫描诊断。对液基细胞学检查结果在ASCUS以上者和DNA倍体分析检查可见异倍体细胞的病例进行对照分析。结果：在8854例体检妇女中，细胞学诊断NILM者8448例（95.41%），其中可见DNA倍体异常者155例，ASC-US者228例（2.57%），其中可见DNA倍体异常者107例，LSIL者93例（1.08%），其中可见DNA倍体异常者69例，ASC-H者43例（0.48%），其中DNA倍体异常者43例，HSIL者42例，其中可见DNA倍体异常者42例（0.47%）。结论：液基细胞学检查（TCT）与DNA定量分析检查在对TCT高级别鳞状上皮内瘤变及可疑高级别鳞状上皮内瘤变的病例的诊断结果一致性较高，采用DNA定量分析与液基细胞学检查相结合的方法，能有效提高宫颈癌普查的检出率。
【关键词】宫颈液基细胞学；DNA定量分析；宫颈癌筛查；TBS分级系统
【中图分类号】R737 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2012）13-0010-02
宫颈癌是最常见的女性生殖系统恶性肿瘤，宫颈癌的发病率和死亡率有增长的趋势且发病年龄趋于年轻化。由于浸润性宫颈癌多由癌前病变发展而来，因此早期检出CIN对防治宫颈癌具有重要意义。近年来，液基细胞学技术一直国内外病理科和妇科首选的宫颈细胞学检查方法，然而随着宫颈细胞学检测技术和方法的不断发展，DNA定量分析技术正作为一种新兴的检查技术不断发展起来。本文通过对液基细胞学技术和DNA定量分析技术的联合应用，探讨两种方法在宫颈癌普查中的应用价值。
1.研究对象和方法
1.1研究对象
201年3月份到2012年3月期间来我院进行宫颈癌普查的妇女共计8854人，年龄在25岁到68岁之间，绝大多数为鄂尔多斯市东胜地区育龄妇女，以往未做过宫颈细胞学检查。
1.2方法
1.2.1取材：由妇科医生在阴道扩张器直视下，用棉签拭去宫颈及阴道分泌物，用宫颈刷从宫颈外口插入宫颈管内约8mm处，顺时针或逆时针旋转3-5圈后，取出宫颈刷，拔下刷头，将刷尖向下浸泡在样本收集管固定液内，旋紧管盖后震荡摇晃，然后贴上标签。
1.2.2检测方法：将装有固定液和刷头的标本收集管，加入0.1%的DTT消化液放在振荡器上振荡2小时，然后将消化后的细胞悬液离心5分钟（800转/分），弃上清液后，加50%乙醇分别清洗，离心2次（800转/分×5分/次）。然后将用固定液稀释的细胞悬液放入涂片离心机甩片5分钟，每例制成2张薄层细胞学片，其中1片进行巴氏染色做细胞学诊断，另一片进行福尔银DNA染色做DNA定量测定。
细胞学巴氏染色片由病理医师读片后做出诊断；细胞福尔银染色片用麦克奥迪细胞DNA定量筛查仪进行扫描并由全自动细胞读片分析系统做出诊断。
1.2.3诊断标准：按照2001版的TBS（The Bethesda System）系统进行细胞病理学诊断，分为未见上皮内病变或恶性细胞（Negative for Intraepithelial Lesion or Malignancy， NILM），无明确诊断意义的非典型鳞状上皮细胞（Atypical Squamous Cells of Undetermined Signification，ASC-US）、非典型鳞状上皮细胞不除外高度鳞状上皮内病变（Atypical Squamsus cells-Cannot exclude HSIL，ASC-H）、低度鳞状上皮内病变（Low-grade squamous Intraepithelial Lesion，LSIL）、高度鳞状上皮内病变（High-grade squamous Intraepithelial Lesion，HSIL）和宫颈癌标本。
DNA定量分析的诊断根据AcCell系统诊断软件的标准，将细胞核DNA指数>2.5的细胞定义为DNA异倍体细胞，分析结果有4种[4]：①未见DNA倍体异常细胞；②可见少量（扫描结果有3个以下的异倍体细胞）；③可见（扫描结果有3～9个异倍体细胞）；④可见大量（扫描结果有10个以上异倍体细胞）。
2.结果
2.1液基细胞学（TCT）诊断结果
未见上皮内病变或恶性细胞（NILM）者：8448例（95.41%）；无明确诊断意义的非典型鳞状上皮细胞（ASC-US）者：228例（2.57%）；非典型鳞状上皮细胞不除外高度鳞状上皮内病变（ASC-H）者：43例（0.48%）；低度鳞状上皮内病变（LSIL）：93例（1.05%）；高度鳞状上皮内病变（HSIL）和宫颈癌标本：42例（0.47%）；
2.2细胞DNA定量分析结果
未见DNA倍体异常细胞者：7403例（83.61%：其中NILM者7306例，ASC-US者85例，LSIL者12例）；可见少量DNA倍体异常细胞者：941例（10.62%：其中NILM者893例，ASC-US者36例，LSIL者12例）；可见少量细胞增生者：86例（0.97%：其中NILM者86例）；可见DNA倍体异常细胞者：416例（4.69%：其中NILM者155例，ASC-US者107例，ASC-H者43例，LSIL者69例，，HSIL者和宫颈癌者：42例）；重新采样：8例（0.09%）。
3.讨论
细胞DNA定量分析与宫颈液基细胞学检查的建议活检（即阳性率）标准为：DNA定量分析可见3个或以上DNA倍体异常细胞；TBS诊断在低度鳞状上皮内病变（LSIL）及以上者。根据结果（DNA定量分析的阳性率为416例，TBS诊断结果阳性率为43+42=85例）得出：
3.1 细胞DNA定量分析检查在宫颈癌普查中的阳性率比较高，其敏感性要高于液基细胞 学检查
3.2 宫颈液基细胞学检查阳性的病例DAN定量分析均几乎可见倍体异常细胞（>3个），两者的阳性符合率非常高；
3.3 由于细胞DNA定量分析检查的阳性率比较高，在宫颈癌普查中不容易造成漏诊，而通过细胞DNA定量分析与宫颈液基细胞学检查相结合的方法，可以使宫颈癌筛查的阳性率更加精确，提高了诊断的准确率，从而使得筛查阳性的患者得到及时的治疗，同时也减少了DNA倍体阳性而液基细胞学检查阴性患者的的心理负担和经济负担。
参考文献
[1] 孙小蓉，李玉兰，车东媛，等.用细胞DNA定量分析方法进行宫颈癌普查的临床研究[J].诊断病理学杂志，2005，1（1）：12.
[2] Gage JC，Hanson VW，Abbey K，et al.Number of cervical biopsiesand sensitivity of colposcopy [J].Obstet Gynecol，2006，108（1）：264.
[3] 李静然，魏丽惠，刘宁 等.FISH检测宫颈脱落细胞TERC基因的表达及临床意义[J].现代妇产科进展，2008，17（10）：725-729.
[4] 田淑贞，窦加拉.HPV检测和TCT在宫颈病变筛查及治疗后随访的应用[J].肿瘤基础与临床，2009，22（5）：455-457.
[5] Lorenzato M ，Caudroy S ，Nou JM，et al.Detection of cervical cancer and high grade neoplastic lesions by a combination of liquid-based sam-pling preparation and DNA measurements using automated image cy-tometry[J].Cell Oncol，2005，27（1）：33-41.
作者简介：
魏永强（1983-） 男 ，毕业于内蒙古医学院本科，住院医师，研究方向：宫颈细胞学检查与病理活检的对照分析。